ರೋಗಿಯ ಸೀರಮ್‌ನ ಹೆಚ್ಚಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯೊಂದಿಗೆ ಸೌಮ್ಯ ಮತ್ತು ಮಾರಕ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವ ಚಯಾಪಚಯಶಾಸ್ತ್ರ.

ಕಂಪ್ಯೂಟೆಡ್ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿ (CT) ಮೂಲಕ ಗುರುತಿಸಲಾದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಭೇದಾತ್ಮಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯವು ವೈದ್ಯಕೀಯ ಅಭ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ಒಂದು ಸವಾಲಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ. ಇಲ್ಲಿ, ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು, ಸೌಮ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಸೇರಿದಂತೆ 480 ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳ ಜಾಗತಿಕ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಾವು ನಿರೂಪಿಸುತ್ತೇವೆ. ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮಗಳು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯವಂತ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳು ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತಾರೆ. ಆವಿಷ್ಕಾರ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ (n = 306), ಸೌಮ್ಯ ಮತ್ತು ಮಾರಕ ಗಂಟುಗಳ ನಡುವೆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ತೋರಿಸಲು 27 ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಗುಂಪನ್ನು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ (n = 104) ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ (n = 111) ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ತಾರತಮ್ಯದ ಮಾದರಿಯ AUC ಕ್ರಮವಾಗಿ 0.915 ಮತ್ತು 0.945 ಆಗಿತ್ತು. ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಸೀರಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆಯಾದ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಹೆಚ್ಚಿದ ಗ್ಲೈಕೊಲೈಟಿಕ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಮಾರ್ಗ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿತು ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಸೇವನೆಯು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಗ್ಲೈಕೊಲಿಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸಿತು. CT ಮೂಲಕ ಪತ್ತೆಯಾದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಅಪಾಯವನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸುವಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನವು ಎತ್ತಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.
ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ರೋಗಿಗಳ ಬದುಕುಳಿಯುವಿಕೆಯ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಆರಂಭಿಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯವು ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ. ಯುಎಸ್ ರಾಷ್ಟ್ರೀಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಟ್ರಯಲ್ (NLST) ಮತ್ತು ಯುರೋಪಿಯನ್ ನೆಲ್ಸನ್ ಅಧ್ಯಯನದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಕಡಿಮೆ-ಡೋಸ್ ಕಂಪ್ಯೂಟೆಡ್ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿ (LDCT) ಯೊಂದಿಗೆ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಪಾಯದ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಮರಣ ಪ್ರಮಾಣ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್‌ಗಾಗಿ LDCT ಯ ವ್ಯಾಪಕ ಬಳಕೆಯ ನಂತರ, ಲಕ್ಷಣರಹಿತ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಪ್ರಾಸಂಗಿಕ ರೇಡಿಯೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಸಂಶೋಧನೆಗಳ ಸಂಭವವು ಹೆಚ್ಚುತ್ತಲೇ ಇದೆ 4. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು 3 ಸೆಂ.ಮೀ ವ್ಯಾಸದವರೆಗಿನ ಫೋಕಲ್ ಅಪಾರದರ್ಶಕತೆಗಳು ಎಂದು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾಗಿದೆ 5. ಮಾರಕತೆಯ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸುವಲ್ಲಿ ಮತ್ತು LDCT ಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಾಸಂಗಿಕವಾಗಿ ಪತ್ತೆಯಾದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ನಿಭಾಯಿಸುವಲ್ಲಿ ನಾವು ತೊಂದರೆಗಳನ್ನು ಎದುರಿಸುತ್ತೇವೆ. CT ಯ ಮಿತಿಗಳು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಅನುಸರಣಾ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳು ಮತ್ತು ತಪ್ಪು-ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು, ಇದು ಅನಗತ್ಯ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪ ಮತ್ತು ಅತಿಯಾದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು 6. ಆದ್ದರಿಂದ, ಆರಂಭಿಕ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ಆರಂಭಿಕ ಪತ್ತೆಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಮತ್ತು ಉಪಯುಕ್ತ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವ ಅವಶ್ಯಕತೆಯಿದೆ 7.
ಜೀನೋಮಿಕ್ಸ್, ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎ ಮೀಥೈಲೇಷನ್ ಸೇರಿದಂತೆ ರಕ್ತದ (ಸೀರಮ್, ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ, ಬಾಹ್ಯ ರಕ್ತದ ಮಾನೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಕೋಶಗಳು) ಸಮಗ್ರ ಆಣ್ವಿಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ಗೆ ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳ ಆವಿಷ್ಕಾರದಲ್ಲಿ ಆಸಕ್ತಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಏತನ್ಮಧ್ಯೆ, ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ವಿಧಾನಗಳು ಅಂತರ್ವರ್ಧಕ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಿಂದ ಪ್ರಭಾವಿತವಾಗಿರುವ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಅಳೆಯುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ರೋಗದ ಆಕ್ರಮಣ ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಊಹಿಸಲು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಟಂಡೆಮ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (LC-MS) ಅದರ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆ ಮತ್ತು ದೊಡ್ಡ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಶ್ರೇಣಿಯಿಂದಾಗಿ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಇದು ವಿಭಿನ್ನ ಭೌತ ರಾಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ11,12,13. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ/ಸೀರಮ್‌ನ ಜಾಗತಿಕ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದ್ದರೂ14,15,16,17 ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವ,18 ಸೌಮ್ಯ ಮತ್ತು ಮಾರಕ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ನಡುವೆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ವರ್ಗೀಕರಣಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಬೇಕಾಗಿದೆ. -ಬೃಹತ್ ಸಂಶೋಧನೆ.
ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಮತ್ತು ಸ್ಕ್ವಾಮಸ್ ಸೆಲ್ ಕಾರ್ಸಿನೋಮಗಳು ಸಣ್ಣದಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ (NSCLC) ನ ಎರಡು ಪ್ರಮುಖ ಉಪವಿಭಾಗಗಳಾಗಿವೆ. ವಿವಿಧ CT ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳು ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ನ ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದ ಹಿಸ್ಟೋಲಾಜಿಕಲ್ ಪ್ರಕಾರವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ1,19,20,21. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು, ಸೌಮ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು CT-ಪತ್ತೆಯಾದ ≤3 ಸೆಂ.ಮೀ ಸೇರಿದಂತೆ ಒಟ್ಟು 695 ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳ ಮೇಲೆ ಚಯಾಪಚಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ನಾವು ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಹೈ-ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (UPLC-HRMS) ಅನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮಕ್ಕಾಗಿ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್. ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಂದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಫಲಕವನ್ನು ನಾವು ಗುರುತಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಅಸಹಜ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮತ್ತು ಗ್ಲೂಕೋಸ್ ಚಯಾಪಚಯವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳಾಗಿವೆ ಎಂದು ಮಾರ್ಗ ಪುಷ್ಟೀಕರಣ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, LDCT ಯಿಂದ ಪತ್ತೆಯಾದ ಮಾರಕ ಮತ್ತು ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ನಡುವೆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲಿಕ್ ವರ್ಗೀಕರಣವನ್ನು ನಾವು ಸ್ಥಾಪಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಇದು ಆರಂಭಿಕ ಭೇದಾತ್ಮಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮತ್ತು ಅಪಾಯದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಕ್ಕೆ ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ಲಿಂಗ ಮತ್ತು ವಯಸ್ಸಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವ ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 174 ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣ ಘಟಕಗಳಿಂದ, ಸೌಮ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ 292 ರೋಗಿಗಳಿಂದ ಮತ್ತು ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಹೊಂದಿರುವ 229 ರೋಗಿಗಳಿಂದ ಹಿಂದಿನಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. 695 ವಿಷಯಗಳ ಜನಸಂಖ್ಯಾ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 1 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಚಿತ್ರ 1a ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, 174 ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣ (HC), 170 ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು (BN), ಮತ್ತು 136 ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ (LA) ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಒಟ್ಟು 480 ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೇಂದ್ರದಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಹೈ-ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (UPLC-HRMS) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ಪ್ರೊಫೈಲಿಂಗ್‌ಗಾಗಿ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಕೊಹಾರ್ಟ್. ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 1 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲು ಮತ್ತು ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಮಾರ್ಗ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಅನ್ವೇಷಿಸಲು LA ಮತ್ತು HC, LA ಮತ್ತು BN ನಡುವಿನ ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೇಂದ್ರದಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾದ 104 ಮಾದರಿಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಎರಡು ಆಸ್ಪತ್ರೆಗಳಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾದ 111 ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಆಂತರಿಕ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣಕ್ಕೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು.
ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಹೈ-ರೆಸಲ್ಯೂಷನ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (UPLC-HRMS) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಜಾಗತಿಕ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಒಳಗಾದ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಕೋಹಾರ್ಟ್‌ನಲ್ಲಿನ ಅಧ್ಯಯನ ಜನಸಂಖ್ಯೆ. b ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು (HC, n = 174), ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು (BN, n = 170), ಮತ್ತು ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ (ಲಾಸ್ ಏಂಜಲೀಸ್, n = 136) ಸೇರಿದಂತೆ ಅಧ್ಯಯನ ಕೋಹಾರ್ಟ್‌ನಿಂದ 480 ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳ ಒಟ್ಟು ಮೆಟಾಬಾಲೊಮ್‌ನ ಭಾಗಶಃ ಕನಿಷ್ಠ ಚೌಕಗಳ ತಾರತಮ್ಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (PLS-DA). +ESI, ಧನಾತ್ಮಕ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಪ್ರೇ ಅಯಾನೀಕರಣ ಮೋಡ್, -ESI, ಋಣಾತ್ಮಕ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಪ್ರೇ ಅಯಾನೀಕರಣ ಮೋಡ್. c–e ಎರಡು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ವಿಭಿನ್ನ ಸಮೃದ್ಧಿಯೊಂದಿಗೆ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು (ಎರಡು-ಬಾಲದ ವಿಲ್ಕಾಕ್ಸನ್ ಸಹಿ ಮಾಡಿದ ಶ್ರೇಣಿ ಪರೀಕ್ಷೆ, ತಪ್ಪು ಅನ್ವೇಷಣೆ ದರ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ p ಮೌಲ್ಯ, FDR <0.05) ಜ್ವಾಲಾಮುಖಿ ಗ್ರಾಫಿಕ್‌ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆ > 1.2) ಮತ್ತು ನೀಲಿ (ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆ < 0.83). ) ಕೆಂಪು (ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆ > 1.2) ಮತ್ತು ನೀಲಿ (ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆ < 0.83) ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. f LA ಮತ್ತು BN ನಡುವಿನ ಟಿಪ್ಪಣಿ ಮಾಡಿದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುವ ಶ್ರೇಣೀಕೃತ ಕ್ಲಸ್ಟರಿಂಗ್ ಶಾಖ ನಕ್ಷೆ. ಮೂಲ ಡೇಟಾವನ್ನು ಮೂಲ ದತ್ತಾಂಶ ಫೈಲ್‌ಗಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಆವಿಷ್ಕಾರ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ 174 HC, 170 BN ಮತ್ತು 136 LA ಗಳ ಒಟ್ಟು ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೋಮ್ ಅನ್ನು UPLC-HRMS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮೊದಲು ನಾವು ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ (QC) ಮಾದರಿಗಳು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡದ ಪ್ರಧಾನ ಘಟಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (PCA) ಮಾದರಿಯ ಮಧ್ಯಭಾಗದಲ್ಲಿ ಬಿಗಿಯಾಗಿ ಕ್ಲಸ್ಟರ್ ಆಗಿರುವುದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತೇವೆ, ಇದು ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸುತ್ತದೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 2).
ಚಿತ್ರ 1 b ಯಲ್ಲಿ ಭಾಗಶಃ ಕನಿಷ್ಠ ಚೌಕಗಳ-ತಾರತಮ್ಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (PLS-DA) ಯಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಧನಾತ್ಮಕ (+ESI) ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ (−ESI) ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಪ್ರೇ ಅಯಾನೀಕರಣ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ LA ಮತ್ತು BN, LA ಮತ್ತು HC ನಡುವೆ ಸ್ಪಷ್ಟ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿವೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ. ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, +ESI ಮತ್ತು -ESI ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ BN ಮತ್ತು HC ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ.
ನಾವು LA ಮತ್ತು HC ನಡುವೆ 382 ಭೇದಾತ್ಮಕ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳನ್ನು, LA ಮತ್ತು BN ನಡುವೆ 231 ಭೇದಾತ್ಮಕ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳನ್ನು ಮತ್ತು BN ಮತ್ತು HC ನಡುವೆ 95 ಭೇದಾತ್ಮಕ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳನ್ನು (ವಿಲ್ಕಾಕ್ಸನ್ ಸಹಿ ಮಾಡಿದ ಶ್ರೇಣಿ ಪರೀಕ್ಷೆ, FDR <0.05 ಮತ್ತು ಬಹು ಬದಲಾವಣೆ >1.2 ಅಥವಾ <0.83) ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಚಿತ್ರ .1c-e). . m/z ಮೌಲ್ಯ, ಧಾರಣ ಸಮಯ ಮತ್ತು ವಿಘಟನಾ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರಮ್ ಹುಡುಕಾಟ (ವಿವರಗಳನ್ನು ವಿಧಾನಗಳ ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ) 22 ಮೂಲಕ ಡೇಟಾಬೇಸ್ (mzCloud/HMDB/Chemspider ಗ್ರಂಥಾಲಯ) ವಿರುದ್ಧ ಶಿಖರಗಳನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಟಿಪ್ಪಣಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ (ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 3). ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಸಮೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ 33 ಮತ್ತು 38 ಟಿಪ್ಪಣಿ ಮಾಡಲಾದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ LA ವರ್ಸಸ್ BN (ಚಿತ್ರ 1f ಮತ್ತು ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 2) ಮತ್ತು LA ವರ್ಸಸ್ HC (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 3 ಮತ್ತು ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 2) ಗಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಸಮೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ 3 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು BN ಮತ್ತು HC (ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 2) ನಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು PLS-DA ನಲ್ಲಿ BN ಮತ್ತು HC ನಡುವಿನ ಅತಿಕ್ರಮಣಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿದೆ. ಈ ವಿಭಿನ್ನ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳು ವ್ಯಾಪಕ ಶ್ರೇಣಿಯ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 4). ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೋಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಸೌಮ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳು ಅಥವಾ ಆರೋಗ್ಯಕರ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಆರಂಭಿಕ ಹಂತದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ನ ಮಾರಕ ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ. ಏತನ್ಮಧ್ಯೆ, BN ಮತ್ತು HC ಯ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೋಮ್‌ನ ಹೋಲಿಕೆಯು ಸೌಮ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳು ಆರೋಗ್ಯಕರ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಅನೇಕ ಜೈವಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಸಬ್ಟೈಪ್ 23 ರಲ್ಲಿ ಎಪಿಡರ್ಮಲ್ ಗ್ರೋತ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ (EGFR) ಜೀನ್ ರೂಪಾಂತರಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೋಮ್‌ನ ಮೇಲೆ ಚಾಲಕ ರೂಪಾಂತರಗಳ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ನಾವು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿದ್ದೇವೆ. ನಂತರ ನಾವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ EGFR ಸ್ಥಿತಿಯೊಂದಿಗೆ 72 ಪ್ರಕರಣಗಳ ಒಟ್ಟಾರೆ ಮೆಟಾಬಾಲೋಮಿಕ್ ಪ್ರೊಫೈಲ್ ಅನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, PCA ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ EGFR ರೂಪಾಂತರಿತ ರೋಗಿಗಳು (n = 41) ಮತ್ತು EGFR ವೈಲ್ಡ್-ಟೈಪ್ ರೋಗಿಗಳ (n = 31) ನಡುವೆ ಹೋಲಿಸಬಹುದಾದ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 5a). ಆದಾಗ್ಯೂ, ವೈಲ್ಡ್-ಟೈಪ್ EGFR (t ಪರೀಕ್ಷೆ, p < 0.05 ಮತ್ತು ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆ > 1.2 ಅಥವಾ < 0.83) ರೋಗಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ EGFR ರೂಪಾಂತರ ಹೊಂದಿರುವ ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಬದಲಾದ 7 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ನಾವು ಗುರುತಿಸಿದ್ದೇವೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 5b). ಈ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನವು (7 ರಲ್ಲಿ 5) ಅಸಿಲ್‌ಕಾರ್ನಿಟೈನ್‌ಗಳಾಗಿವೆ, ಇದು ಕೊಬ್ಬಿನಾಮ್ಲ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ ಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತದೆ.
ಚಿತ್ರ 2 a ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ಕೆಲಸದ ಹರಿವಿನಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ, LA (n = 136) ಮತ್ತು BN (n = 170) ನಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾದ 33 ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್‌ಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಕನಿಷ್ಠ ಸಂಪೂರ್ಣ ಕುಗ್ಗುವಿಕೆ ನಿರ್ವಾಹಕರು ಮತ್ತು ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಗಂಟು ವರ್ಗೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ವೇರಿಯೇಬಲ್‌ಗಳ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸಂಯೋಜನೆ (LASSO) - ಬೈನರಿ ಲಾಜಿಸ್ಟಿಕ್ ರಿಗ್ರೆಷನ್ ಮಾದರಿ. ಮಾದರಿಯ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಹತ್ತು ಪಟ್ಟು ಅಡ್ಡ-ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ವೇರಿಯಬಲ್ ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತು ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ ಕ್ರಮಬದ್ಧಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ λ24 ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಭವನೀಯತೆಯ ಗರಿಷ್ಠೀಕರಣ ದಂಡದಿಂದ ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಾರತಮ್ಯ ಮಾದರಿಯ ವರ್ಗೀಕರಣ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ (n = 104) ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ (n = 111) ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಜಾಗತಿಕ ಚಯಾಪಚಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಆವಿಷ್ಕಾರ ಸೆಟ್‌ನಲ್ಲಿರುವ 27 ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಅತಿದೊಡ್ಡ ಸರಾಸರಿ AUC ಮೌಲ್ಯದೊಂದಿಗೆ (ಚಿತ್ರ 2b) ಅತ್ಯುತ್ತಮ ತಾರತಮ್ಯ ಮಾದರಿ ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ 9 ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿವೆ ಮತ್ತು LA ನಲ್ಲಿ 18 ಕಡಿಮೆ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ.
ಹತ್ತು ಪಟ್ಟು ಅಡ್ಡ-ಮೌಲ್ಯಮಾಪನದ ಮೂಲಕ ಬೈನರಿ ಲಾಜಿಸ್ಟಿಕ್ ರಿಗ್ರೆಷನ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಡಿಸ್ಕವರಿ ಸೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಫಲಕವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಸೆಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಮುನ್ಸೂಚಕ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವುದು ಸೇರಿದಂತೆ ಪಲ್ಮನರಿ ಗಂಟು ವರ್ಗೀಕರಣವನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸಲು ವರ್ಕ್‌ಫ್ಲೋ. b ಮೆಟಾಬಾಲಿಕ್ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್ ಆಯ್ಕೆಗಾಗಿ LASSO ರಿಗ್ರೆಷನ್ ಮಾದರಿಯ ಕ್ರಾಸ್-ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಅಂಕಿಅಂಶಗಳು. ಮೇಲೆ ನೀಡಲಾದ ಸಂಖ್ಯೆಗಳು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ λ ನಲ್ಲಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾದ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳ ಸರಾಸರಿ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ. ಕೆಂಪು ಚುಕ್ಕೆಗಳ ರೇಖೆಯು ಅನುಗುಣವಾದ ಲ್ಯಾಂಬ್ಡಾದಲ್ಲಿ ಸರಾಸರಿ AUC ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ. ಬೂದು ದೋಷ ಪಟ್ಟಿಗಳು ಕನಿಷ್ಠ ಮತ್ತು ಗರಿಷ್ಠ AUC ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ. ಚುಕ್ಕೆಗಳ ರೇಖೆಯು 27 ಆಯ್ದ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. AUC, ರಿಸೀವರ್ ಆಪರೇಟಿಂಗ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣ (ROC) ವಕ್ರರೇಖೆಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರದೇಶ. c ಡಿಸ್ಕವರಿ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿರುವ BN ಗುಂಪಿನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LA ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ 27 ಆಯ್ದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆಗಳು. ಕೆಂಪು ಕಾಲಮ್ - ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆ. ನೀಲಿ ಕಾಲಮ್ ಕುಸಿತವಾಗಿದೆ. d–f ಡಿಸ್ಕವರಿ, ಆಂತರಿಕ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಸೆಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ 27 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್ ಸಂಯೋಜನೆಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ತಾರತಮ್ಯ ಮಾದರಿಯ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ತೋರಿಸುವ ರಿಸೀವರ್ ಆಪರೇಟಿಂಗ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣ (ROC) ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳು. ಮೂಲ ಡೇಟಾವನ್ನು ಮೂಲ ಡೇಟಾ ಫೈಲ್‌ಗಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಈ 27 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ತೂಕದ ಹಿಂಜರಿತ ಗುಣಾಂಕಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಒಂದು ಭವಿಷ್ಯ ಮಾದರಿಯನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ (ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 3). ಈ 27 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿದ ROC ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು 0.933 ರ ವಕ್ರರೇಖೆಯ (AUC) ಮೌಲ್ಯದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ನೀಡಿತು, ಆವಿಷ್ಕಾರ ಗುಂಪಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ 0.868 ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ 0.859 ಆಗಿತ್ತು (ಚಿತ್ರ 2d). ಏತನ್ಮಧ್ಯೆ, LA ಮತ್ತು HC ನಡುವಿನ 38 ಟಿಪ್ಪಣಿ ಮಾಡಲಾದ ಭೇದಾತ್ಮಕ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ, 16 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಒಂದು ಸೆಟ್ 0.902 ರ AUC ಅನ್ನು 0.801 ರ ಸಂವೇದನೆ ಮತ್ತು 0.856 ರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯೊಂದಿಗೆ HC ಯಿಂದ LA ಅನ್ನು ತಾರತಮ್ಯ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ಸಾಧಿಸಿತು (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 6a-c). ಭೇದಾತ್ಮಕ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ವಿಭಿನ್ನ ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆಯ ಮಿತಿಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿದ AUC ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಸಹ ಹೋಲಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು 1.2 ಅಥವಾ 2.0 ವಿರುದ್ಧ ಹೊಂದಿಸಿದಾಗ LA ಮತ್ತು BN (HC) ನಡುವೆ ತಾರತಮ್ಯ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 7a,b). 27 ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿದ ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಆಂತರಿಕ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಸಮೂಹಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತಷ್ಟು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ AUC 0.915 (ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ 0.867, ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ 0.811) ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ 0.945 (ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ 0.810, ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ 0.979) (ಚಿತ್ರ 2e, f). ಅಂತರ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು, ವಿಧಾನಗಳ ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಬಾಹ್ಯ ಸಮೂಹದಿಂದ 40 ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಬಾಹ್ಯ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ವರ್ಗೀಕರಣ ನಿಖರತೆಯು 0.925 ರ AUC ಅನ್ನು ಸಾಧಿಸಿದೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 8). ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ (LUAD) ನಂತರ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಸ್ಕ್ವಾಮಸ್ ಸೆಲ್ ಕಾರ್ಸಿನೋಮ (LUSC) ಸಣ್ಣದಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ (NSCLC) ನ ಎರಡನೇ ಸಾಮಾನ್ಯ ಉಪವಿಭಾಗವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ನಾವು ಚಯಾಪಚಯ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳ ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಸಂಭಾವ್ಯ ಉಪಯುಕ್ತತೆಯನ್ನು ಸಹ ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ್ದೇವೆ. BN ಮತ್ತು LUSC ಯ 16 ಪ್ರಕರಣಗಳು. LUSC ಮತ್ತು BN ನಡುವಿನ ತಾರತಮ್ಯದ AUC 0.776 ಆಗಿತ್ತು (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 9), ಇದು LUAD ಮತ್ತು BN ನಡುವಿನ ತಾರತಮ್ಯಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಕಳಪೆ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
CT ಚಿತ್ರಗಳಲ್ಲಿನ ಗಂಟುಗಳ ಗಾತ್ರವು ಮಾರಕತೆಯ ಸಾಧ್ಯತೆಯೊಂದಿಗೆ ಸಕಾರಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಗಂಟು ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಪ್ರಮುಖ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಅಂಶವಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ25,26,27. NELSON ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನದ ದೊಡ್ಡ ಗುಂಪಿನಿಂದ ಪಡೆದ ದತ್ತಾಂಶದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ನೋಡ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ವಿಷಯಗಳಲ್ಲಿ <5 mm ಹೊಂದಿರುವ ವಿಷಯಗಳಲ್ಲಿ ಮಾರಕತೆಯ ಅಪಾಯವು ನೋಡ್‌ಗಳಿಲ್ಲದ ವಿಷಯಗಳಲ್ಲಿರುವಂತೆಯೇ ಇದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ28. ಆದ್ದರಿಂದ, ನಿಯಮಿತ CT ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಕನಿಷ್ಠ ಗಾತ್ರವು ಬ್ರಿಟಿಷ್ ಥೋರಾಸಿಕ್ ಸೊಸೈಟಿ (BTS) ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಿದಂತೆ 5 mm ಮತ್ತು ಫ್ಲೀಷ್ನರ್ ಸೊಸೈಟಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಿದಂತೆ 6 mm ಆಗಿದೆ29. ಆದಾಗ್ಯೂ, 6 mm ಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾದ ಮತ್ತು ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪಲ್ಮನರಿ ಗಂಟುಗಳು (IPN) ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಸ್ಪಷ್ಟ ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಗಂಟುಗಳು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಅಭ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಸವಾಲಾಗಿ ಉಳಿದಿವೆ30,31. ಆವಿಷ್ಕಾರ ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಸಮೂಹಗಳಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಗಂಟು ಗಾತ್ರವು ಚಯಾಪಚಯ ಸಹಿಗಳ ಮೇಲೆ ಪ್ರಭಾವ ಬೀರಿದೆಯೇ ಎಂದು ನಾವು ಮುಂದೆ ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ. 27 ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳ ಮೇಲೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿ, ನಾವು ಮೊದಲು HC ಮತ್ತು BN ಸಬ್-6 mm ಮೆಟಾಬೊಲೋಮ್‌ಗಳ PCA ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಸಿದ್ದೇವೆ. HC ಮತ್ತು BN ಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಡೇಟಾ ಪಾಯಿಂಟ್‌ಗಳು ಅತಿಕ್ರಮಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿರುವುದನ್ನು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಇದು ಎರಡೂ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಹೋಲುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 3a). ವಿಭಿನ್ನ ಗಾತ್ರದ ಶ್ರೇಣಿಗಳಲ್ಲಿನ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯ ನಕ್ಷೆಗಳು BN ಮತ್ತು LA ನಲ್ಲಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ (ಚಿತ್ರ 3b, c), ಆದರೆ 6–20 mm ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಮಾರಕ ಮತ್ತು ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳ ನಡುವೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 3d). ಈ ಸಮೂಹವು 6 ರಿಂದ 20 mm ಅಳತೆಯ ಗಂಟುಗಳ ಮಾರಕತೆಯನ್ನು ಊಹಿಸಲು 0.927 AUC, 0.868 ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ ಮತ್ತು 0.820 ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿತ್ತು (ಚಿತ್ರ 3e, f). ಗಂಟು ಗಾತ್ರವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ, ಆರಂಭಿಕ ಮಾರಕ ರೂಪಾಂತರದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಚಯಾಪಚಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ವರ್ಗೀಕರಣಕಾರವು ಸೆರೆಹಿಡಿಯಬಹುದು ಎಂದು ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ.
ad 27 ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಮೆಟಾಬಾಲಿಕ್ ವರ್ಗೀಕರಣವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ PCA ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳ ಹೋಲಿಕೆ. CC ಮತ್ತು BN < 6 mm. b BN < 6 mm vs BN 6–20 mm. LA 6–20 mm vs LA 20–30 mm. g BN 6–20 mm ಮತ್ತು LA 6–20 mm. GC, n = 174; BN < 6 mm, n = 153; BN 6–20 mm, n = 91; LA 6–20 mm, n = 89; LA 20–30 mm, n = 77. e 6–20 mm ಗಂಟುಗಳಿಗೆ ತಾರತಮ್ಯದ ಮಾದರಿ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುವ ರಿಸೀವರ್ ಆಪರೇಟಿಂಗ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣ (ROC) ಕರ್ವ್. f ಸಂಭವನೀಯತೆ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು 6–20 mm ಅಳತೆಯ ಗಂಟುಗಳಿಗೆ ಲಾಜಿಸ್ಟಿಕ್ ರಿಗ್ರೆಷನ್ ಮಾದರಿಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ. ಬೂದು ಚುಕ್ಕೆಗಳ ರೇಖೆಯು ಸೂಕ್ತ ಕಟ್‌ಆಫ್ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ (0.455). ಮೇಲಿನ ಸಂಖ್ಯೆಗಳು ಲಾಸ್ ಏಂಜಲೀಸ್‌ಗೆ ಯೋಜಿಸಲಾದ ಪ್ರಕರಣಗಳ ಶೇಕಡಾವಾರು ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ. ಎರಡು ಬಾಲದ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳ ಟಿ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಿ. ಪಿಸಿಎ, ಪ್ರಧಾನ ಘಟಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ. ವಕ್ರರೇಖೆಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ AUC ಪ್ರದೇಶ. ಮೂಲ ಡೇಟಾವನ್ನು ಮೂಲ ದತ್ತಾಂಶ ಫೈಲ್‌ಗಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಪ್ರಸ್ತಾವಿತ ಮಾರಕತೆಯ ಮುನ್ಸೂಚನೆ ಮಾದರಿಯ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ವಿವರಿಸಲು (ಚಿತ್ರ 4a, b) ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟು ಗಾತ್ರಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ನಾಲ್ಕು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು (44–61 ವರ್ಷ ವಯಸ್ಸಿನವರು) ಮತ್ತಷ್ಟು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಆರಂಭಿಕ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ, ಪ್ರಕರಣ 1 ಅನ್ನು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಫಿಕೇಶನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಘನ ಗಂಟು ಎಂದು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಸೌಮ್ಯತೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಒಂದು ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಪ್ರಕರಣ 2 ಯಾವುದೇ ಸ್ಪಷ್ಟ ಸೌಮ್ಯ ಲಕ್ಷಣಗಳಿಲ್ಲದ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಭಾಗಶಃ ಘನ ಗಂಟು ಎಂದು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಫಾಲೋ-ಅಪ್ CT ಸ್ಕ್ಯಾನ್‌ಗಳ ಮೂರು ಸುತ್ತುಗಳು ಈ ಪ್ರಕರಣಗಳು 4 ವರ್ಷಗಳ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಉಳಿದಿವೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಅವುಗಳನ್ನು ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 4a). ಸರಣಿ CT ಸ್ಕ್ಯಾನ್‌ಗಳ ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನದೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಪ್ರಸ್ತುತ ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯೊಂದಿಗೆ ಏಕ-ಶಾಟ್ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಸಂಭವನೀಯ ನಿರ್ಬಂಧಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಈ ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಮತ್ತು ಸರಿಯಾಗಿ ಗುರುತಿಸಿದೆ (ಕೋಷ್ಟಕ 1). ಪ್ರಕರಣ 3 ರಲ್ಲಿ ಚಿತ್ರ 4b ಪ್ಲೆರಲ್ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ಚಿಹ್ನೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಗಂಟುವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಮಾರಕತೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ32. ಪ್ರಕರಣ 4 ಅನ್ನು ಸೌಮ್ಯ ಕಾರಣದ ಯಾವುದೇ ಪುರಾವೆಗಳಿಲ್ಲದ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಭಾಗಶಃ ಘನ ಗಂಟು ಎಂದು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯ ಪ್ರಕಾರ ಈ ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಕರಣಗಳನ್ನು ಮಾರಕವೆಂದು ಊಹಿಸಲಾಗಿದೆ (ಕೋಷ್ಟಕ 1). ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಛೇದನ ಶಸ್ತ್ರಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ನಂತರ ಹಿಸ್ಟೋಪಾಥೋಲಾಜಿಕಲ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯಿಂದ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ 4b). ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಸೆಟ್‌ಗಾಗಿ, ಚಯಾಪಚಯ ವರ್ಗೀಕರಣವು 6 ಮಿಮೀ ಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾದ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಎರಡು ಪ್ರಕರಣಗಳನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಊಹಿಸಿದೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 10).
ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳ ಎರಡು ಪ್ರಕರಣಗಳ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಕ್ಷೀಯ ಕಿಟಕಿಯ CT ಚಿತ್ರಗಳು. ಪ್ರಕರಣ 1 ರಲ್ಲಿ, 4 ವರ್ಷಗಳ ನಂತರ CT ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಬಲ ಕೆಳಗಿನ ಹಾಲೆಯಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಫಿಕೇಶನ್‌ನೊಂದಿಗೆ 7 ಮಿಮೀ ಅಳತೆಯ ಸ್ಥಿರವಾದ ಘನ ಗಂಟು ತೋರಿಸಿದೆ. ಪ್ರಕರಣ 2 ರಲ್ಲಿ, 5 ವರ್ಷಗಳ ನಂತರ CT ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಬಲ ಮೇಲಿನ ಹಾಲೆಯಲ್ಲಿ 7 ಮಿಮೀ ವ್ಯಾಸವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸ್ಥಿರವಾದ, ಭಾಗಶಃ ಘನ ಗಂಟು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದೆ. b ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಕ್ಷೀಯ ವಿಂಡೋ CT ಚಿತ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಛೇದನದ ಮೊದಲು ಹಂತ I ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ ಎರಡು ಪ್ರಕರಣಗಳ ಅನುಗುಣವಾದ ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಅಧ್ಯಯನಗಳು. ಪ್ರಕರಣ 3 ಬಲ ಮೇಲಿನ ಹಾಲೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ಲೆರಲ್ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ 8 ಮಿಮೀ ವ್ಯಾಸವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಗಂಟು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದೆ. ಪ್ರಕರಣ 4 ಎಡ ಮೇಲಿನ ಹಾಲೆಯಲ್ಲಿ 9 ಮಿಮೀ ಅಳತೆಯ ಭಾಗಶಃ ಘನವಾದ ನೆಲದ-ಗಾಜಿನ ಗಂಟು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದೆ. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ ಅಸಿನಾರ್ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವ ಹೆಮಟಾಕ್ಸಿಲಿನ್ ಮತ್ತು ಇಯೋಸಿನ್ (H&E) ಕಲೆ. CT ಚಿತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಯಾದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಬಾಣಗಳು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. H&E ಚಿತ್ರಗಳು ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರಜ್ಞರು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ ಬಹು (>3) ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳ ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರಗಳಾಗಿವೆ.
ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ, ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಭೇದಾತ್ಮಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯದಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳ ಸಂಭಾವ್ಯ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು CT ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವಾಗ ಸವಾಲುಗಳನ್ನು ಒಡ್ಡಬಹುದು.
ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಪ್ಯಾನೆಲ್ ಅನ್ನು ಆಧರಿಸಿ, ಪ್ರಮುಖ ಚಯಾಪಚಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳ ಜೈವಿಕ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ನಾವು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಮೆಟಾಬೊಅನಾಲಿಸ್ಟ್‌ನಿಂದ KEGG ಮಾರ್ಗ ಪುಷ್ಟೀಕರಣ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಎರಡು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವೆ 6 ಸಾಮಾನ್ಯ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಬದಲಾದ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದೆ (LA vs. HC ಮತ್ತು LA vs. BN, ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಮಾಡಲಾದ p ≤ 0.001, ಪರಿಣಾಮ > 0.01). ಈ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಪೈರುವೇಟ್ ಚಯಾಪಚಯ, ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಚಯಾಪಚಯ, ನಿಯಾಸಿನ್ ಮತ್ತು ನಿಕೋಟಿನಮೈಡ್ ಚಯಾಪಚಯ, ಗ್ಲೈಕೋಲಿಸಿಸ್, TCA ಚಕ್ರ ಮತ್ತು ಪ್ಯೂರಿನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿನ ಅಡಚಣೆಗಳಿಂದ ನಿರೂಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟವು (ಚಿತ್ರ 5a). ನಂತರ ನಾವು ಸಂಪೂರ್ಣ ಪರಿಮಾಣೀಕರಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರಮುಖ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು ಗುರಿಪಡಿಸಿದ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ನಿರ್ವಹಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಅಧಿಕೃತ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಟ್ರಿಪಲ್ ಕ್ವಾಡ್ರುಪೋಲ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (QQQ) ಮೂಲಕ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬದಲಾದ ಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ನಿರ್ಣಯ. ಚಯಾಪಚಯ ಅಧ್ಯಯನ ಗುರಿ ಮಾದರಿಯ ಜನಸಂಖ್ಯಾ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 4 ರಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಮ್ಮ ಜಾಗತಿಕ ಚಯಾಪಚಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು BN ಮತ್ತು HC ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LA ನಲ್ಲಿ ಹೈಪೋಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಮತ್ತು ಕ್ಸಾಂಥೈನ್, ಪೈರುವೇಟ್ ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಎಂದು ದೃಢಪಡಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 5b, c, p <0.05). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ BN ಮತ್ತು HC ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ.
BN ಮತ್ತು HC ಗುಂಪುಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LA ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ವಿಭಿನ್ನವಾದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ KEGG ಮಾರ್ಗ ಪುಷ್ಟೀಕರಣ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ. ಎರಡು-ಬಾಲದ ಗ್ಲೋಬಲ್‌ಟೆಸ್ಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಹೋಲ್ಮ್-ಬಾನ್‌ಫೆರೋನಿ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು p ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಯಿತು (ಹೊಂದಾಣಿಕೆ p ≤ 0.001 ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮದ ಗಾತ್ರ > 0.01). LC-MS/MS (ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿಗೆ n = 70) ನಿರ್ಧರಿಸಿದ ಸೀರಮ್ HC, BN, ಮತ್ತು LA ನಲ್ಲಿ ಹೈಪೋಕ್ಸಾಂಥೈನ್, ಕ್ಸಾಂಥೈನ್, ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್, ಪೈರುವೇಟ್ ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ತೋರಿಸುವ b–d ವಯೋಲಿನ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಗಳು. ಬಿಳಿ ಮತ್ತು ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆಗಳ ರೇಖೆಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಸರಾಸರಿ ಮತ್ತು ಕ್ವಾರ್ಟೈಲ್ ಅನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. LUAD-TCGA ಡೇಟಾಸೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಂಗಾಂಶಕ್ಕೆ (n = 59) ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದಲ್ಲಿ SLC7A5 ಮತ್ತು QPRT ಯ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ Log2TPM (ಪ್ರತಿ ಮಿಲಿಯನ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಲಿಪಿಗಳು) mRNA ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ತೋರಿಸುವ e ವಯೋಲಿನ್ ಪ್ಲಾಟ್ (n = 513). ಬಿಳಿ ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯು ಇಂಟರ್‌ಕ್ವಾರ್ಟೈಲ್ ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ, ಮಧ್ಯದಲ್ಲಿರುವ ಸಮತಲ ಕಪ್ಪು ರೇಖೆಯು ಮಧ್ಯವನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯಿಂದ ವಿಸ್ತರಿಸಿರುವ ಲಂಬ ಕಪ್ಪು ರೇಖೆಯು 95% ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಮಧ್ಯಂತರವನ್ನು (CI) ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ. f ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ (n = 513) ಮತ್ತು TCGA ಡೇಟಾಸೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಂಗಾಂಶ (n = 59) ನಲ್ಲಿ SLC7A5 ಮತ್ತು GAPDH ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಪಿಯರ್ಸನ್ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧದ ಕಥಾವಸ್ತು. ಬೂದು ಪ್ರದೇಶವು 95% CI ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ. r, ಪಿಯರ್ಸನ್ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ ಗುಣಾಂಕ. g LC-MS/MS ನಿರ್ಧರಿಸಿದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ shRNA ನಿಯಂತ್ರಣ (NC) ಮತ್ತು shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ನೊಂದಿಗೆ ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ A549 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮಟ್ಟಗಳು. ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಐದು ಜೈವಿಕವಾಗಿ ಸ್ವತಂತ್ರ ಮಾದರಿಗಳ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. h A549 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ (NC) ಮತ್ತು SLC7A5 ನಾಕ್‌ಡೌನ್ A549 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ (Sh1, Sh2) NADt (ಒಟ್ಟು NAD, NAD+ ಮತ್ತು NADH ಸೇರಿದಂತೆ). ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಮೂರು ಜೈವಿಕವಾಗಿ ಸ್ವತಂತ್ರ ಮಾದರಿಗಳ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. i SLC7A5 ನಾಕ್‌ಡೌನ್ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ನಂತರ A549 ಕೋಶಗಳ ಗ್ಲೈಕೋಲಿಟಿಕ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಆಮ್ಲೀಕರಣ ದರ (ECAR) (n = ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿಗೆ 4 ಜೈವಿಕವಾಗಿ ಸ್ವತಂತ್ರ ಮಾದರಿಗಳು) ಮೂಲಕ ಅಳೆಯಲಾಯಿತು. 2-DG,2-ಡಿಯೋಕ್ಸಿ-D-ಗ್ಲೂಕೋಸ್. ಎರಡು ಬಾಲದ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳ ಟಿ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು (b–h) ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. (g–i) ನಲ್ಲಿ, ದೋಷ ಪಟ್ಟಿಗಳು ಸರಾಸರಿ ± SD ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ, ಪ್ರತಿ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಮೂರು ಬಾರಿ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಹೋಲುತ್ತವೆ. ಮೂಲ ಡೇಟಾವನ್ನು ಮೂಲ ಡೇಟಾ ಫೈಲ್‌ಗಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ.
LA ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಬದಲಾದ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಗಮನಾರ್ಹ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಿ, QQQ ಬಳಸಿಕೊಂಡು HC, BN ಮತ್ತು LA ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಸಹ ನಾವು ನಿರ್ಣಯಿಸಿದ್ದೇವೆ. HC ಅಥವಾ BN ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LA ನಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (p < 0.001, ಚಿತ್ರ 5d), ಇದು ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪಿನಿಂದ ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಗಿಂತ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಹೊಂದಿರುವ ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ ಪರಿಚಲನೆ ಮಾಡುವ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಎಂಬ ಹಿಂದಿನ ಸಂಶೋಧನೆಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿದೆ33,34,35. PET/CT ಟ್ರೇಸರ್ 11C-ಮೀಥೈಲ್-L-ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ಮತ್ತೊಂದು ಅಧ್ಯಯನವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಧಾರಣ ಸಮಯವು ಸೌಮ್ಯವಾದ ಗಾಯಗಳು ಅಥವಾ ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ36. LA ಸೀರಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್‌ನಲ್ಲಿನ ಇಳಿಕೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಸಕ್ರಿಯ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ಊಹಿಸುತ್ತೇವೆ.
ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಕ್ಯಾಟಬಾಲಿಸಂನ ಕೈನುರೆನೈನ್ ಮಾರ್ಗದ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವು NAD+37,38 ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ, ಇದು ಗ್ಲೈಕೋಲಿಸಿಸ್‌ನಲ್ಲಿ 1,3-ಬಿಸ್ಫಾಸ್ಫೋಗ್ಲಿಸರೇಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಗ್ಲೈಸೆರಾಲ್ಡಿಹೈಡ್-3-ಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಪ್ರಮುಖ ತಲಾಧಾರವಾಗಿದೆ39. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಕ್ಯಾಟಬಾಲಿಸಂನ ಪಾತ್ರದ ಮೇಲೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದ್ದರೂ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಅನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಕೊಲೈಟಿಕ್ ಮಾರ್ಗಗಳ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟಪಡಿಸಲು ನಾವು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿದ್ದೇವೆ. ದ್ರಾವಣ ಸಾಗಣೆದಾರ ಕುಟುಂಬ 7 ಸದಸ್ಯರು 5 (SLC7A5) ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಸಾಗಣೆದಾರ ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ43,44,45. ಕ್ವಿನೋಲಿನಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಫಾಸ್ಫೊರಿಬೊಸಿಲ್ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫರೇಸ್ (QPRT) ಕೈನುರೆನೈನ್ ಮಾರ್ಗದ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿರುವ ಕಿಣ್ವವಾಗಿದ್ದು ಅದು ಕ್ವಿನೋಲಿನಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು NAMN46 ಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. LUAD TCGA ಡೇಟಾಸೆಟ್‌ನ ಪರಿಶೀಲನೆಯು SLC7A5 ಮತ್ತು QPRT ಎರಡನ್ನೂ ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಗೆಡ್ಡೆಯ ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 5e). ಈ ಹೆಚ್ಚಳವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ ಹಂತ I ಮತ್ತು II ಹಾಗೂ ಹಂತ III ಮತ್ತು IV ಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 11), ಇದು ಟ್ಯೂಮರಿಜೆನೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿನ ಆರಂಭಿಕ ಅಡಚಣೆಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, LUAD-TCGA ಡೇಟಾಸೆಟ್ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ರೋಗಿಗಳ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ SLC7A5 ಮತ್ತು GAPDH mRNA ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಡುವೆ ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ (r = 0.45, p = 1.55E-26, ಚಿತ್ರ 5f). ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಸಾಮಾನ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿ ಅಂತಹ ಜೀನ್ ಸಹಿಗಳ ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಗಮನಾರ್ಹ ಸಂಬಂಧ ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ (r = 0.25, p = 0.06, ಚಿತ್ರ 5f). A549 ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ SLC7A5 (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 12) ನ ನಾಕ್‌ಡೌನ್ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮತ್ತು NAD(H) ಮಟ್ಟವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿತು (ಚಿತ್ರ 5g,h), ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಆಮ್ಲೀಕರಣ ದರ (ECAR) (ಚಿತ್ರ 1) ನಿಂದ ಅಳೆಯಲ್ಪಟ್ಟ ದುರ್ಬಲಗೊಂಡ ಗ್ಲೈಕೊಲೈಟಿಕ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 1). 5i). ಹೀಗಾಗಿ, ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಪತ್ತೆಯಲ್ಲಿನ ಚಯಾಪಚಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಚಯಾಪಚಯವು ಕೈನುರೆನಿನ್ ಮಾರ್ಗದ ಮೂಲಕ NAD+ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ನಲ್ಲಿ ಗ್ಲೈಕೊಲಿಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಊಹಿಸುತ್ತೇವೆ.
LDCT ಯಿಂದ ಪತ್ತೆಯಾದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳು PET-CT, ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಬಯಾಪ್ಸಿ ಮತ್ತು ಮಾರಕತೆಯ ತಪ್ಪು-ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯದಿಂದಾಗಿ ಅತಿಯಾದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಂತಹ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಅಗತ್ಯಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. 31 ಚಿತ್ರ 6 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನವು ಸಂಭಾವ್ಯ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮೌಲ್ಯದೊಂದಿಗೆ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಫಲಕವನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದೆ, ಇದು CT ಯಿಂದ ಪತ್ತೆಯಾದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಅಪಾಯದ ಶ್ರೇಣೀಕರಣ ಮತ್ತು ನಂತರದ ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು.
ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ-ಡೋಸ್ ಕಂಪ್ಯೂಟೆಡ್ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿ (LDCT) ಬಳಸಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಅಥವಾ ಮಾರಕ ಕಾರಣಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುವ ಚಿತ್ರಣ ಲಕ್ಷಣಗಳು ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ. ಗಂಟುಗಳ ಅನಿಶ್ಚಿತ ಫಲಿತಾಂಶವು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಫಾಲೋ-ಅಪ್ ಭೇಟಿಗಳು, ಅನಗತ್ಯ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಗಳು ಮತ್ತು ಅತಿಯಾದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಮೌಲ್ಯದೊಂದಿಗೆ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲಿಕ್ ವರ್ಗೀಕರಣಕಾರಕಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುವುದರಿಂದ ಅಪಾಯದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ನಂತರದ ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು. PET ಪಾಸಿಟ್ರಾನ್ ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿ.
ಯುಎಸ್ ಎನ್ಎಲ್ಎಸ್ಟಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮತ್ತು ಯುರೋಪಿಯನ್ ನೆಲ್ಸನ್ ಅಧ್ಯಯನದ ದತ್ತಾಂಶವು ಕಡಿಮೆ-ಡೋಸ್ ಕಂಪ್ಯೂಟೆಡ್ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿ (ಎಲ್ಡಿಸಿಟಿ) ಹೊಂದಿರುವ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಪಾಯದ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಮರಣ ಪ್ರಮಾಣ ಕಡಿಮೆಯಾಗಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಎಲ್ಡಿಸಿಟಿಯಿಂದ ಪತ್ತೆಯಾದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಆಕಸ್ಮಿಕ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಅಪಾಯದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ನಿರ್ವಹಣೆ ಅತ್ಯಂತ ಸವಾಲಿನದ್ದಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ. ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ಎಲ್ಡಿಸಿಟಿ-ಆಧಾರಿತ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್‌ಗಳ ಸರಿಯಾದ ವರ್ಗೀಕರಣವನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ.
ರಕ್ತದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳಂತಹ ಕೆಲವು ಆಣ್ವಿಕ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳನ್ನು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅನ್ನು ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸುವ ಮೂಲಕ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, LDCT ಯಿಂದ ಆಕಸ್ಮಿಕವಾಗಿ ಪತ್ತೆಯಾದ ಸೌಮ್ಯ ಮತ್ತು ಮಾರಕ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ನಡುವೆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೋಮಿಕ್ಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಅನ್ವಯದ ಮೇಲೆ ನಾವು ಗಮನಹರಿಸಿದ್ದೇವೆ. UPLC-HRMS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಜಾಗತಿಕ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೋಮ್ (HC), ಸೌಮ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳು (BN), ಮತ್ತು ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ (LA) ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನಾವು ಹೋಲಿಸಿದ್ದೇವೆ. HC ಮತ್ತು BN ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಚಯಾಪಚಯ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಆದರೆ LA HC ಮತ್ತು BN ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಗಮನಾರ್ಹ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ. HC ಮತ್ತು BN ನಿಂದ LA ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವ ಎರಡು ಸೆಟ್ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ನಾವು ಗುರುತಿಸಿದ್ದೇವೆ.
ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಮತ್ತು ಮಾರಕ ಗಂಟುಗಳಿಗೆ ಪ್ರಸ್ತುತ LDCT-ಆಧಾರಿತ ಗುರುತಿನ ಯೋಜನೆಯು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಕಾಲಾನಂತರದಲ್ಲಿ ಗಂಟುಗಳ ಗಾತ್ರ, ಸಾಂದ್ರತೆ, ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ದರವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ30. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಗಂಟುಗಳ ಗಾತ್ರವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ನ ಸಾಧ್ಯತೆಗೆ ನಿಕಟ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿವೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಪಾಯದ ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿಯೂ ಸಹ, ನೋಡ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಮಾರಕತೆಯ ಅಪಾಯವು <6 mm <1% ಆಗಿದೆ. 6 ರಿಂದ 20 mm ಅಳತೆಯ ಗಂಟುಗಳಿಗೆ ಮಾರಕತೆಯ ಅಪಾಯವು 8% ರಿಂದ 64% ವರೆಗೆ ಇರುತ್ತದೆ30. ಆದ್ದರಿಂದ, ಫ್ಲೀಷ್ನರ್ ಸೊಸೈಟಿಯು ನಿಯಮಿತ CT ಫಾಲೋ-ಅಪ್‌ಗಾಗಿ 6 ​​mm ನ ಕಟ್‌ಆಫ್ ವ್ಯಾಸವನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡುತ್ತದೆ. 29 ಆದಾಗ್ಯೂ, 6 mm ಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾದ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ (IPN) ಅಪಾಯದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ಸಮರ್ಪಕವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ31. ಜನ್ಮಜಾತ ಹೃದಯ ಕಾಯಿಲೆಯ ಪ್ರಸ್ತುತ ನಿರ್ವಹಣೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಆಗಾಗ್ಗೆ CT ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಜಾಗರೂಕ ಕಾಯುವಿಕೆಯನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ.
ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಆರೋಗ್ಯವಂತ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳು ಮತ್ತು ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳ ನಡುವಿನ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಹಿಗಳ ಅತಿಕ್ರಮಣವನ್ನು ನಾವು ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದ್ದೇವೆ <6 ಮಿಮೀ. ಜೈವಿಕ ಹೋಲಿಕೆಯು ಹಿಂದಿನ CT ಸಂಶೋಧನೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿದೆ, ಇದು ಗಂಟುಗಳಿಲ್ಲದ ವಿಷಯಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ <6 ಮಿಮೀ ಗಂಟುಗಳಿಗೆ ಮಾರಕತೆಯ ಅಪಾಯ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.30 ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳು <6 ಮಿಮೀ ಮತ್ತು ≥6 ಮಿಮೀ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಬೇಕು, ಇದು ಸೌಮ್ಯ ಎಟಿಯಾಲಜಿಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನವು ಗಂಟುಗಳ ಗಾತ್ರವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಆಧುನಿಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಪ್ಯಾನೆಲ್‌ಗಳು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ CT ಯಲ್ಲಿ ಗಂಟುಗಳು ಪತ್ತೆಯಾದಾಗ ಮತ್ತು ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ಸರಣಿ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿದಾಗ ನಿಯಮ-ಔಟ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯಾಗಿ ಒಂದೇ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸಬಹುದು. ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಚಯಾಪಚಯ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳ ಅದೇ ಫಲಕವು ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳಿಂದ ≥6 ಮಿಮೀ ಗಾತ್ರದ ಮಾರಕ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು CT ಚಿತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದೇ ಗಾತ್ರದ ಮತ್ತು ಅಸ್ಪಷ್ಟ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳ IPN ಗಳಿಗೆ ನಿಖರವಾದ ಮುನ್ಸೂಚನೆಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಸೀರಮ್ ಚಯಾಪಚಯ ವರ್ಗೀಕರಣಕಾರಕವು 0.927 ರ AUC ಯೊಂದಿಗೆ ≥6 ಮಿಮೀ ಗಂಟುಗಳ ಮಾರಕತೆಯನ್ನು ಊಹಿಸುವಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿತು. ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ಸಹಿಗಳು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಆರಂಭಿಕ ಗೆಡ್ಡೆ-ಪ್ರೇರಿತ ಚಯಾಪಚಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಗಂಟು ಗಾತ್ರವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ ಅಪಾಯದ ಮುನ್ಸೂಚಕಗಳಾಗಿ ಸಂಭಾವ್ಯ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ.
ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ, ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ (LUAD) ಮತ್ತು ಸ್ಕ್ವಾಮಸ್ ಸೆಲ್ ಕಾರ್ಸಿನೋಮ (LUSC) ಸಣ್ಣದಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ (NSCLC) ನ ಪ್ರಮುಖ ವಿಧಗಳಾಗಿವೆ. LUSC ತಂಬಾಕು ಬಳಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಬಲವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ [47] ಮತ್ತು CT ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಯಾದ ಆಕಸ್ಮಿಕ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ LUAD ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದ ಹಿಸ್ಟಾಲಜಿಯಾಗಿದೆ [48], ನಮ್ಮ ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹಂತ I ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಮಾದರಿಗಳಿಗಾಗಿ ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಾಂಗ್ ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳು LUAD ಮೇಲೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದರು ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕರ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳಿಂದ ಆರಂಭಿಕ ಹಂತದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಲಿಪಿಡೋಮಿಕ್ಸ್ ಬಳಸಿ ಒಂಬತ್ತು ಲಿಪಿಡ್ ಸಹಿಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದರು [5]. ಹಂತ I LUSC ಯ 16 ಪ್ರಕರಣಗಳು ಮತ್ತು 74 ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳ ಮೇಲೆ ನಾವು ಪ್ರಸ್ತುತ ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ LUSC ಮುನ್ಸೂಚನೆಯ ನಿಖರತೆಯನ್ನು (AUC 0.776) ಗಮನಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಇದು LUAD ಮತ್ತು LUSC ತಮ್ಮದೇ ಆದ ಚಯಾಪಚಯ ಸಹಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ವಾಸ್ತವವಾಗಿ, LUAD ಮತ್ತು LUSC ಎಟಿಯಾಲಜಿ, ಜೈವಿಕ ಮೂಲ ಮತ್ತು ಆನುವಂಶಿಕ ವಿಚಲನಗಳಲ್ಲಿ ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ [5]. ಆದ್ದರಿಂದ, ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮಗಳಲ್ಲಿ ಜನಸಂಖ್ಯೆ ಆಧಾರಿತ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ತರಬೇತಿ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಇತರ ರೀತಿಯ ಹಿಸ್ಟಾಲಜಿಯನ್ನು ಸೇರಿಸಬೇಕು.
ಇಲ್ಲಿ, ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಸೌಮ್ಯವಾದ ಗಂಟುಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬದಲಾಗುವ ಆರು ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ನಾವು ಗುರುತಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಮತ್ತು ಹೈಪೋಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಪ್ಯೂರಿನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಮಾರ್ಗದ ಸಾಮಾನ್ಯ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಾಗಿವೆ. ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಹೊಂದಿರುವ ರೋಗಿಗಳ ಸೀರಮ್ ಅಥವಾ ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಅಥವಾ ಪೂರ್ವ-ಆಕ್ರಮಣಕಾರಿ ಹಂತದಲ್ಲಿ ರೋಗಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಪ್ಯೂರಿನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಮಧ್ಯಂತರಗಳು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿವೆ15,50. ಹೆಚ್ಚಿದ ಸೀರಮ್ ಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಮತ್ತು ಹೈಪೋಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ವೇಗವಾಗಿ ಹರಡುವುದರಿಂದ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಅನಾಬೊಲಿಸಮ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸಬಹುದು. ಗ್ಲೂಕೋಸ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಅನಿಯಂತ್ರಣವು ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರಸಿದ್ಧ ಲಕ್ಷಣವಾಗಿದೆ51. ಇಲ್ಲಿ, HC ಮತ್ತು BN ಗುಂಪಿನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LA ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಪೈರುವೇಟ್ ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ನಾವು ಗಮನಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಇದು ಸಣ್ಣದಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶದ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ (NSCLC) ರೋಗಿಗಳು ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕರ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬೊಲೋಮ್ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಗ್ಲೈಕೋಲೈಟಿಕ್ ಮಾರ್ಗದ ಅಸಹಜತೆಗಳ ಹಿಂದಿನ ವರದಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿದೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಸ್ಥಿರವಾಗಿವೆ52,53.
ಮುಖ್ಯವಾಗಿ, ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮಗಳ ಸೀರಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಪೈರುವೇಟ್ ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ನಡುವಿನ ವಿಲೋಮ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ನಾವು ಗಮನಿಸಿದ್ದೇವೆ. HC ಅಥವಾ BN ಗುಂಪಿನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LA ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿವೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಸಮೂಹವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಹಿಂದಿನ ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣದ ಅಧ್ಯಯನವು ಕಡಿಮೆ ಮಟ್ಟದ ಪರಿಚಲನೆ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಪಾಯದೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ 54. ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ನಾವು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಆಹಾರದಿಂದ ಪಡೆಯುವ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲವಾಗಿದೆ. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಸವಕಳಿಯು ಈ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್‌ನ ತ್ವರಿತ ಸವಕಳಿಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ತೀರ್ಮಾನಿಸುತ್ತೇವೆ. ಕೈನುರೆನಿನ್ ಮಾರ್ಗದ ಮೂಲಕ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಕ್ಯಾಟಬಾಲಿಸಂನ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವು ಡಿ ನೊವೊ NAD+ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೂಲವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಎಲ್ಲರಿಗೂ ತಿಳಿದಿದೆ. NAD+ ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ ರಕ್ಷಣೆ ಮಾರ್ಗದ ಮೂಲಕ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವುದರಿಂದ, ಆರೋಗ್ಯ ಮತ್ತು ರೋಗದಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ NAD+ ನ ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಯನ್ನು ಇನ್ನೂ ನಿರ್ಧರಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ46. TCGA ಡೇಟಾಬೇಸ್‌ನ ನಮ್ಮ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು, ಸಾಮಾನ್ಯ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಪೋರ್ಟರ್ ದ್ರಾವಣ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಪೋರ್ಟರ್ 7A5 (SLC7A5) ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಕೊಲೈಟಿಕ್ ಕಿಣ್ವ GAPDH ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಕಾರಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಆಂಟಿಟ್ಯೂಮರ್ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿಗ್ರಹಿಸುವಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಕ್ಯಾಟಬಾಲಿಸಮ್‌ನ ಪಾತ್ರದ ಮೇಲೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದೆ40,41,42. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ SLC7A5 ಅನ್ನು ನಾಕ್‌ಡೌನ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವುದರಿಂದ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ NAD ಮಟ್ಟಗಳಲ್ಲಿ ನಂತರದ ಇಳಿಕೆ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಕೊಲೈಟಿಕ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಏಕಕಾಲಿಕ ಕ್ಷೀಣತೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಇಲ್ಲಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತೇವೆ. ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ ಮಾರಕ ರೂಪಾಂತರಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಸೀರಮ್ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನವು ಜೈವಿಕ ಆಧಾರವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.
NSCLC ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ EGFR ರೂಪಾಂತರಗಳು ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದ ಚಾಲಕ ರೂಪಾಂತರಗಳಾಗಿವೆ. ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, EGFR ರೂಪಾಂತರ (n = 41) ಹೊಂದಿರುವ ರೋಗಿಗಳು ವೈಲ್ಡ್-ಟೈಪ್ EGFR (n = 31) ಹೊಂದಿರುವ ರೋಗಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲುವ ಒಟ್ಟಾರೆ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದಾರೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ ಅಸಿಲ್ಕಾರ್ನಿಟೈನ್ ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಲವು EGFR ರೂಪಾಂತರಿತ ರೋಗಿಗಳ ಸೀರಮ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿರುವುದನ್ನು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ. ಅಸಿಲ್ಕಾರ್ನಿಟೈನ್‌ಗಳ ಸ್ಥಾಪಿತ ಕಾರ್ಯವೆಂದರೆ ಸೈಟೋಪ್ಲಾಸಂನಿಂದ ಮೈಟೋಕಾಂಡ್ರಿಯಲ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್‌ಗೆ ಅಸಿಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಸಾಗಿಸುವುದು, ಇದು ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಕೊಬ್ಬಿನಾಮ್ಲಗಳ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ 55. ನಮ್ಮ ಸಂಶೋಧನೆಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಧ್ಯಯನವು 102 ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಗಳ ಜಾಗತಿಕ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮ್ ಅನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವ ಮೂಲಕ EGFR ರೂಪಾಂತರಿತ ಮತ್ತು EGFR ವೈಲ್ಡ್-ಟೈಪ್ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ನಡುವೆ ಇದೇ ರೀತಿಯ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮ್ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದೆ50. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, EGFR ರೂಪಾಂತರಿತ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಅಸಿಲ್ಕಾರ್ನಿಟೈನ್ ಅಂಶವೂ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಅಸಿಲ್ಕಾರ್ನಿಟೈನ್ ಮಟ್ಟಗಳಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳು EGFR-ಪ್ರೇರಿತ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತವೆಯೇ ಮತ್ತು ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ಆಣ್ವಿಕ ಮಾರ್ಗಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಅರ್ಹವಾಗಬಹುದು.
ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ, ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನವು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಗಂಟುಗಳ ಭೇದಾತ್ಮಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕಾಗಿ ಸೀರಮ್ ಚಯಾಪಚಯ ವರ್ಗೀಕರಣವನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಪಾಯದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸುವ ಮತ್ತು CT ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ಸುಗಮಗೊಳಿಸುವ ಕೆಲಸದ ಹರಿವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸುತ್ತದೆ.
ಈ ಅಧ್ಯಯನವನ್ನು ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಆಸ್ಪತ್ರೆಯ ನೈತಿಕ ಸಮಿತಿ, ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಮೊದಲ ಸಂಯೋಜಿತ ಆಸ್ಪತ್ರೆ ಮತ್ತು ಝೆಂಗ್‌ಝೌ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಆಸ್ಪತ್ರೆಯ ನೈತಿಕ ಸಮಿತಿಯು ಅನುಮೋದಿಸಿದೆ. ಆವಿಷ್ಕಾರ ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ, ಆರೋಗ್ಯವಂತ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳಿಂದ 174 ಸೆರಾ ಮತ್ತು ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳಿಂದ 244 ಸೆರಾವನ್ನು ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೇಂದ್ರದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆ ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ವಾರ್ಷಿಕ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿಗೆ ಒಳಗಾಗುವ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 166 ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸೀರಮ್. ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮಗಳನ್ನು ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೇಂದ್ರದಿಂದ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಸಮೂಹದಲ್ಲಿ, ಸೌಮ್ಯ ಗಂಟುಗಳ 48 ಪ್ರಕರಣಗಳು, ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಮೊದಲ ಸಂಯೋಜಿತ ಆಸ್ಪತ್ರೆಯಿಂದ ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ 39 ಪ್ರಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಝೆಂಗ್‌ಝೌ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಆಸ್ಪತ್ರೆಯಿಂದ ಹಂತ I ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮದ 24 ಪ್ರಕರಣಗಳು ಇದ್ದವು. ಸ್ಥಾಪಿತ ಚಯಾಪಚಯ ವರ್ಗೀಕರಣದ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೇಂದ್ರವು ಹಂತ I ಸ್ಕ್ವಾಮಸ್ ಕೋಶ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್‌ನ 16 ಪ್ರಕರಣಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದೆ (ರೋಗಿಯ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 5 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ). ಜನವರಿ 2018 ಮತ್ತು ಮೇ 2020 ರ ನಡುವೆ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಕೊಹಾರ್ಟ್ ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ಸಿಂಧುತ್ವ ಕೊಹಾರ್ಟ್‌ನಿಂದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬಾಹ್ಯ ಸಿಂಧುತ್ವ ಕೊಹಾರ್ಟ್‌ಗಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಆಗಸ್ಟ್ 2021 ಮತ್ತು ಅಕ್ಟೋಬರ್ 2022 ರ ನಡುವೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಲಿಂಗ ಪಕ್ಷಪಾತವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು, ಪ್ರತಿ ಸಿಂಧುತ್ವಕ್ಕೆ ಸರಿಸುಮಾರು ಸಮಾನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಪುರುಷ ಮತ್ತು ಸ್ತ್ರೀ ಪ್ರಕರಣಗಳನ್ನು ನಿಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ಡಿಸ್ಕವರಿ ತಂಡ ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ಪರಿಶೀಲನಾ ತಂಡ. ಸ್ವಯಂ ವರದಿಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಭಾಗವಹಿಸುವವರ ಲಿಂಗವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. ಎಲ್ಲಾ ಭಾಗವಹಿಸುವವರಿಂದ ಮಾಹಿತಿಯುಕ್ತ ಒಪ್ಪಿಗೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಯಾವುದೇ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಒದಗಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಗಂಟುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ವಿಷಯಗಳು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ 2 ರಿಂದ 5 ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರವಾದ CT ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಸ್ಕೋರ್ ಹೊಂದಿರುವವರು, ಬಾಹ್ಯ ಸಿಂಧುತ್ವ ಮಾದರಿಯಿಂದ 1 ಪ್ರಕರಣವನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸಿ, ಇದನ್ನು ಶಸ್ತ್ರಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಮುನ್ನ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಹಿಸ್ಟೋಪಾಥಾಲಜಿಯಿಂದ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಬ್ರಾಂಕೈಟಿಸ್ ಹೊರತುಪಡಿಸಿ. ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡೆನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಪ್ರಕರಣಗಳನ್ನು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಛೇದನದ ಮೊದಲು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ರೋಗನಿರ್ಣಯದಿಂದ ದೃಢಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಯಾವುದೇ ಹೆಪ್ಪುರೋಧಕಗಳಿಲ್ಲದೆ ಸೀರಮ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕೊಳವೆಗಳಲ್ಲಿ ಉಪವಾಸ ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು. ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆ ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿಸಿ ನಂತರ 4 ° C ನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 2851 × g ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಿ ಸೀರಮ್ ಸೂಪರ್‌ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು. ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವವರೆಗೆ ಸೀರಮ್ ಆಲ್ಕೋಟ್‌ಗಳನ್ನು -80 ° C ನಲ್ಲಿ ಫ್ರೀಜ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೇಂದ್ರದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆ ಮತ್ತು ವೈದ್ಯಕೀಯ ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಭಾಗವು 40 ರಿಂದ 55 ವರ್ಷ ವಯಸ್ಸಿನ ಸಮಾನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಪುರುಷರು ಮತ್ತು ಮಹಿಳೆಯರನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ 100 ಆರೋಗ್ಯವಂತ ದಾನಿಗಳಿಂದ ಸೀರಮ್‌ನ ಪೂಲ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿತು. ಪ್ರತಿ ದಾನಿ ಮಾದರಿಯ ಸಮಾನ ಪರಿಮಾಣಗಳನ್ನು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಲಾಯಿತು, ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಪೂಲ್ ಅನ್ನು -80 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು. ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ಡೇಟಾ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಸೀರಮ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖ ವಸ್ತುವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು.
ಉಲ್ಲೇಖ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಕರಗಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸಂಯೋಜಿತ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು (MTBE/ಮೀಥನಾಲ್/ನೀರು) 56. ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ, 50 μl ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು 225 μl ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ ಮೆಥನಾಲ್ ಮತ್ತು 750 μl ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ ಮೀಥೈಲ್ ಟೆರ್ಟ್-ಬ್ಯುಟೈಲ್ ಈಥರ್ (MTBE) ನೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಲಾಯಿತು. ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೆರೆಸಿ 1 ಗಂಟೆ ಮಂಜುಗಡ್ಡೆಯ ಮೇಲೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ 188 μl MS-ಗ್ರೇಡ್ ನೀರಿನೊಂದಿಗೆ ಸುಳಿಯನ್ನು ಬೆರೆಸಲಾಯಿತು (13C-ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್, 13C3-ಪೈರುವೇಟ್, 13C-ಮೆಥಿಯೋನಿನ್ ಮತ್ತು 13C6-ಐಸೊಲ್ಯೂಸಿನ್, ಕೇಂಬ್ರಿಡ್ಜ್ ಐಸೊಟೋಪ್ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ). ನಂತರ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 15,000 × g ನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 4 °C ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕೆಳಗಿನ ಹಂತವನ್ನು ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ LC-MS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಎರಡು ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಾಗಿ (ತಲಾ 125 μL) ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ವೇಗದ ನಿರ್ವಾತ ಸಾಂದ್ರಕದಲ್ಲಿ ಒಣಗಲು ಆವಿಯಾಗಿಸಲಾಯಿತು.
ಒಣಗಿದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು 80% ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್‌ನ 120 μl ನಲ್ಲಿ ಪುನರ್ರಚಿಸಲಾಯಿತು, 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸುಳಿಯುವಂತೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 4 ° C ನಲ್ಲಿ 15,000 × g ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಸೂಪರ್‌ನೇಟಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗಾಗಿ ಮೈಕ್ರೋಇನ್ಸರ್ಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಆಂಬರ್ ಗ್ಲಾಸ್ ಬಾಟಲುಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು. ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಹೈ-ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (UPLC-HRMS) ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ. ಡಯೋನೆಕ್ಸ್ ಅಲ್ಟಿಮೇಟ್ 3000 UPLC ಸಿಸ್ಟಮ್ ಮತ್ತು ACQUITY BEH ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್ (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, ವಾಟರ್ಸ್) ಬಳಸಿ ಮೆಟಾಬಾಲೊಯಿಟ್‌ಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಧನಾತ್ಮಕ ಅಯಾನು ಮೋಡ್‌ನಲ್ಲಿ, ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತಗಳು 95% (A) ಮತ್ತು 50% ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ (B), ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ 10 mmol/L ಅಮೋನಿಯಂ ಅಸಿಟೇಟ್ ಮತ್ತು 0.1% ಫಾರ್ಮಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಋಣಾತ್ಮಕ ಕ್ರಮದಲ್ಲಿ, ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತಗಳು A ಮತ್ತು B ಕ್ರಮವಾಗಿ 95% ಮತ್ತು 50% ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ, ಎರಡೂ ಹಂತಗಳು 10 mmol/L ಅಮೋನಿಯಂ ಅಸಿಟೇಟ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ, pH = 9. ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿತ್ತು: 0–0.5 ನಿಮಿಷ, 2% B; 0.5–12 ನಿಮಿಷ, 2–50% B; 12–14 ನಿಮಿಷ, 50–98% B; 14–16 ನಿಮಿಷ, 98% B; 16–16.1. ನಿಮಿಷ, 98 –2% B; 16.1–20 ನಿಮಿಷ, 2% B. ಆಟೋಸ್ಯಾಂಪ್ಲರ್‌ನಲ್ಲಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು 40°C ನಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯನ್ನು 10°C ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ 0.3 ಮಿಲಿ/ನಿಮಿಷ, ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪ್ರಮಾಣ 3 μl ಆಗಿತ್ತು. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಪ್ರೇ ಅಯಾನೀಕರಣ (ESI) ಮೂಲವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ Q-Exactive Orbitrap ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೀಟರ್ (ಥರ್ಮೋ ಫಿಶರ್ ಸೈಂಟಿಫಿಕ್) ಅನ್ನು ಪೂರ್ಣ ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮೋಡ್‌ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣದ ಡೇಟಾವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ddMS2 ಮಾನಿಟರಿಂಗ್ ಮೋಡ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಯಿತು. MS ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ: ಸ್ಪ್ರೇ ವೋಲ್ಟೇಜ್ +3.8 kV/- 3.2 kV, ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ತಾಪಮಾನ 320°C, ಶೀಲ್ಡಿಂಗ್ ಗ್ಯಾಸ್ 40 arb, ಸಹಾಯಕ ಅನಿಲ 10 arb, ಪ್ರೋಬ್ ಹೀಟರ್ ತಾಪಮಾನ 350°C, ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಶ್ರೇಣಿ 70–1050 m/h, ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್. 70 000. Xcalibur 4.1 (ಥರ್ಮೋ ಫಿಶರ್ ಸೈಂಟಿಫಿಕ್) ಬಳಸಿ ಡೇಟಾವನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.
ಡೇಟಾ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು, ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯಿಂದ 10 μL ಸೂಪರ್‌ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವ ಮೂಲಕ ಪೂಲ್ ಮಾಡಿದ ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣ (QC) ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಯಿತು. UPLC-MS ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಅನುಕ್ರಮದ ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಆರು ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್‌ಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನಿಯತಕಾಲಿಕವಾಗಿ ಬ್ಯಾಚ್‌ಗೆ ಪರಿಚಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಎಲ್ಲಾ 11 ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳ ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು LC-MS ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದೆ. ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಚ್-ಟು-ಬ್ಯಾಚ್ ಪರಿಣಾಮಗಳಿಗೆ ಹೊಂದಿಸಲು 100 ಆರೋಗ್ಯವಂತ ದಾನಿಗಳಿಂದ ಸೀರಮ್ ಪೂಲ್ ಮಿಶ್ರಣದ ಆಲ್ಕೋಟ್‌ಗಳನ್ನು ಆಯಾ ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಉಲ್ಲೇಖ ವಸ್ತುವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಸನ್ ಯಾಟ್-ಸೆನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಮೆಟಾಬೊಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಕೇಂದ್ರದಲ್ಲಿ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಕೋಹಾರ್ಟ್, ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಕೋಹಾರ್ಟ್ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಕೋಹಾರ್ಟ್‌ನ ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ಮೆಟಾಬೊಲೊಮಿಕ್ಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಗುವಾಂಗ್‌ಡಾಂಗ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಾ ಕೇಂದ್ರದ ಬಾಹ್ಯ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯವು ವರ್ಗೀಕರಣ ಮಾದರಿಯ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಬಾಹ್ಯ ಕೋಹಾರ್ಟ್‌ನಿಂದ 40 ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದೆ.
ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಪುನರ್ರಚನೆಯ ನಂತರ, ಬಹು-ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ (MRM) ಮೋಡ್‌ನಲ್ಲಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಪ್ರೇ ಅಯಾನೀಕರಣ (ESI) ಮೂಲದೊಂದಿಗೆ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಹೈ ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಟಂಡೆಮ್ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (ಎಜಿಲೆಂಟ್ 6495 ಟ್ರಿಪಲ್ ಕ್ವಾಡ್ರುಪೋಲ್) ಬಳಸಿ ಸೀರಮ್ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಯಿತು. ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ACQUITY BEH ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್ (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, ವಾಟರ್ಸ್) ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತವು 10 mmol/L ಅಮೋನಿಯಂ ಅಸಿಟೇಟ್ ಮತ್ತು 0.1% ಅಮೋನಿಯಾ ದ್ರಾವಣದೊಂದಿಗೆ 90% (A) ಮತ್ತು 5% ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ (B) ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿತ್ತು. ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿತ್ತು: 0–1.5 ನಿಮಿಷ, 0% B; 1.5–6.5 ನಿಮಿಷ, 0–15% B; 6.5–8 ನಿಮಿಷ, 15% B; 8–8.5 ನಿಮಿಷ, 15%–0% B; 8.5–11.5 ನಿಮಿಷ, 0%B. ಆಟೋಸ್ಯಾಂಪ್ಲರ್‌ನಲ್ಲಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು 40 °C ನಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯನ್ನು 10 °C ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಯಿತು. ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ 0.3 mL/ನಿಮಿಷ ಮತ್ತು ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪರಿಮಾಣ 1 μL ಆಗಿತ್ತು. MS ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ: ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ವೋಲ್ಟೇಜ್ ±3.5 kV, ನೆಬ್ಯುಲೈಜರ್ ಒತ್ತಡ 35 psi, ಪೊರೆ ಅನಿಲ ಹರಿವು 12 L/ನಿಮಿಷ, ಪೊರೆ ಅನಿಲ ತಾಪಮಾನ 350°C, ಒಣಗಿಸುವ ಅನಿಲ ತಾಪಮಾನ 250°C, ಮತ್ತು ಒಣಗಿಸುವ ಅನಿಲ ಹರಿವು 14 l/ನಿಮಿಷ. ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್, ಪೈರುವೇಟ್, ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್, ಹೈಪೋಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಮತ್ತು ಕ್ಸಾಂಥೈನ್‌ನ MRM ಪರಿವರ್ತನೆಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ 205.0–187.9, 87.0–43.4, 89.0–43.3, 135.0–92.3 ಮತ್ತು 151.0–107. 9. ಮಾಸ್ ಹಂಟರ್ B.07.00 (ಎಜಿಲೆಂಟ್ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್) ಬಳಸಿ ಡೇಟಾವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್, ಪೈರುವೇಟ್, ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್, ಹೈಪೋಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಮತ್ತು ಕ್ಸಾಂಥೈನ್ ಗಳನ್ನು ಪ್ರಮಾಣಿತ ಮಿಶ್ರಣ ದ್ರಾವಣಗಳ ಮಾಪನಾಂಕ ನಿರ್ಣಯ ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಜೀವಕೋಶ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಅಂಶವನ್ನು ಆಂತರಿಕ ಮಾನದಂಡ ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು.
ಸಂಯುಕ್ತ ಆವಿಷ್ಕಾರ 3.1 ಮತ್ತು ಟ್ರೇಸ್‌ಫೈಂಡರ್ 4.0 (ಥರ್ಮೋ ಫಿಶರ್ ಸೈಂಟಿಫಿಕ್) ಬಳಸಿ ಗರಿಷ್ಠ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ (m/z ಮತ್ತು ಧಾರಣ ಸಮಯ (RT)) ಅನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳ ನಡುವಿನ ಸಂಭಾವ್ಯ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು, ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ವಿಶಿಷ್ಟ ಶಿಖರವನ್ನು ಅದೇ ಬ್ಯಾಚ್‌ನಿಂದ ಉಲ್ಲೇಖ ವಸ್ತುವಿನ ವಿಶಿಷ್ಟ ಶಿಖರದಿಂದ ಭಾಗಿಸಿ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಸಮೃದ್ಧಿಯನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು. ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣದ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ನಂತರದ ಆಂತರಿಕ ಮಾನದಂಡಗಳ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಿಚಲನಗಳನ್ನು ಪೂರಕ ಕೋಷ್ಟಕ 6 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ತಪ್ಪು ಆವಿಷ್ಕಾರ ದರ (FDR<0.05, ವಿಲ್ಕಾಕ್ಸನ್ ಸಹಿ ಮಾಡಿದ ಶ್ರೇಣಿ ಪರೀಕ್ಷೆ) ಮತ್ತು ಪಟ್ಟು ಬದಲಾವಣೆ (>1.2 ಅಥವಾ <0.83) ನಿಂದ ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳ ಕಚ್ಚಾ MS ಡೇಟಾ ಮತ್ತು ಉಲ್ಲೇಖ ಸೀರಮ್-ಸರಿಪಡಿಸಿದ MS ಡೇಟಾವನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 1 ಮತ್ತು ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಗುರುತಿಸಲಾದ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳು, ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ಟಿಪ್ಪಣಿ ಮಾಡಲಾದ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು, ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ನಿರೂಪಿಸಲಾದ ಸಂಯುಕ್ತ ವರ್ಗಗಳು ಮತ್ತು ಅಜ್ಞಾತ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು 22 ಸೇರಿದಂತೆ ನಾಲ್ಕು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾದ ಗುರುತಿನ ಹಂತಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಗರಿಷ್ಠ ಟಿಪ್ಪಣಿಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಕಾಂಪೌಂಡ್ ಡಿಸ್ಕವರಿ 3.1 (mzCloud, HMDB, Chemspider) ನಲ್ಲಿನ ಡೇಟಾಬೇಸ್ ಹುಡುಕಾಟಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, MS/MS ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಜೈವಿಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಅಥವಾ mzCloud (ಸ್ಕೋರ್ > 85) ಅಥವಾ Chemspider ನಲ್ಲಿ ನಿಖರವಾದ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳನ್ನು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಮೆಟಾಬೊಲೋಮ್ ನಡುವಿನ ಮಧ್ಯಂತರಗಳಾಗಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಕ್ಕೂ ಗರಿಷ್ಠ ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳನ್ನು ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 3 ರಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮೆಟಾಬೊಅನಾಲಿಸ್ಟ್ 5.0 ಅನ್ನು ಮೊತ್ತ-ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಸಮೃದ್ಧಿಯ ಏಕರೂಪ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಮೆಟಾಬೊಅನಾಲಿಸ್ಟ್ 5.0 ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ವಿಭಿನ್ನ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್‌ಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ KEGG ಮಾರ್ಗ ಪುಷ್ಟೀಕರಣ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಸಹ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿತು. ಪ್ರಧಾನ ಘಟಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (PCA) ಮತ್ತು ಭಾಗಶಃ ಕನಿಷ್ಠ ಚೌಕಗಳ ತಾರತಮ್ಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (PLS-DA) ಅನ್ನು ರೋಪ್ಲ್ಸ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಪ್ಯಾಕೇಜ್ (v.1.26.4) ಅನ್ನು ಸ್ಟ್ಯಾಕ್ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಣ ಮತ್ತು ಆಟೋಸ್ಕೇಲಿಂಗ್‌ನೊಂದಿಗೆ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ನೋಡ್ಯೂಲ್ ಮಾರಕತೆಯನ್ನು ಊಹಿಸಲು ಸೂಕ್ತ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕನಿಷ್ಠ ಸಂಪೂರ್ಣ ಕುಗ್ಗುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಆಯ್ಕೆ ಆಪರೇಟರ್ (LASSO, R ಪ್ಯಾಕೇಜ್ v.4.1-3) ಹೊಂದಿರುವ ಬೈನರಿ ಲಾಜಿಸ್ಟಿಕ್ ರಿಗ್ರೆಷನ್ ಬಳಸಿ ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪತ್ತೆ ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಸೆಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ತಾರತಮ್ಯ ಮಾದರಿಯ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು pROC ಪ್ಯಾಕೇಜ್ (v.1.18.0.) ಪ್ರಕಾರ ROC ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ AUC ಅನ್ನು ಅಂದಾಜು ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮಾದರಿಯ ಗರಿಷ್ಠ ಯೂಡೆನ್ ಸೂಚ್ಯಂಕವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಸೂಕ್ತ ಸಂಭವನೀಯತೆಯ ಕಡಿತವನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ (ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ + ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ - 1). ಮಿತಿಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಗಂಟುಗಳು ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಡಿನೊಕಾರ್ಸಿನೋಮ ಎಂದು ಊಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
A549 ಕೋಶಗಳನ್ನು (#CCL-185, ಅಮೇರಿಕನ್ ಟೈಪ್ ಕಲ್ಚರ್ ಕಲೆಕ್ಷನ್) 10% FBS ಹೊಂದಿರುವ F-12K ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು. SLC7A5 ಅನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಟ್ಟುಕೊಂಡು ಶಾರ್ಟ್ ಹೇರ್‌ಪಿನ್ RNA (shRNA) ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ನಿಯಂತ್ರಣ (NC) ಅನ್ನು ಲೆಂಟಿವೈರಲ್ ವೆಕ್ಟರ್ pLKO.1-puro ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. shSLC7A5 ನ ಆಂಟಿಸೆನ್ಸ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿವೆ: Sh1 (5′-GGAGAAACCTGATGAACAGTT-3′), Sh2 (5′-GCCGTGGACTTCGGGAACTAT-3′). SLC7A5 (#5347) ಮತ್ತು ಟ್ಯೂಬ್ಯುಲಿನ್ (#2148) ಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಸೆಲ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ. ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ SLC7A5 ಮತ್ತು ಟ್ಯೂಬ್ಯುಲಿನ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು 1:1000 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು.
ಸೀಹಾರ್ಸ್ XF ಗ್ಲೈಕೋಲಿಟಿಕ್ ಒತ್ತಡ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಆಮ್ಲೀಕರಣ (ECAR) ಮಟ್ಟವನ್ನು ಅಳೆಯುತ್ತದೆ. ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ, ECAR ನಿಂದ ಅಳೆಯಲ್ಪಟ್ಟ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಗ್ಲೈಕೋಲಿಟಿಕ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಗ್ಲೂಕೋಸ್, ಆಲಿಗೋಮೈಸಿನ್ A ಮತ್ತು 2-DG ಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ನೀಡಲಾಯಿತು.
ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ನಿಯಂತ್ರಣ (NC) ಮತ್ತು shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ನೊಂದಿಗೆ ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ A549 ಕೋಶಗಳನ್ನು 10 ಸೆಂ.ಮೀ ವ್ಯಾಸದ ಭಕ್ಷ್ಯಗಳಲ್ಲಿ ರಾತ್ರಿಯಿಡೀ ಲೇಪಿಸಲಾಯಿತು. ಜೀವಕೋಶದ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು 1 ಮಿಲಿ ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ 80% ಜಲೀಯ ಮೆಥನಾಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು. ಮೀಥನಾಲ್ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿರುವ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಕೆರೆದು, ಹೊಸ ಟ್ಯೂಬ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ, ಮತ್ತು 4 ° C ನಲ್ಲಿ 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 15,000 × g ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು. 800 µl ಸೂಪರ್‌ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಮತ್ತು ಹೈ-ಸ್ಪೀಡ್ ವ್ಯಾಕ್ಯೂಮ್ ಕಾನ್ಸೆಂಟ್ರೇಟರ್ ಬಳಸಿ ಒಣಗಿಸಿ. ನಂತರ ಒಣಗಿದ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಉಂಡೆಗಳನ್ನು ಮೇಲೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ LC-MS/MS ಬಳಸಿ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್ ಮಟ್ಟಗಳಿಗಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು. A549 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ (NC ಮತ್ತು shSLC7A5) ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ NAD(H) ಮಟ್ಟವನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ NAD+/NADH ವರ್ಣಮಾಪನ ಕಿಟ್ (#K337, ಬಯೋವಿಷನ್) ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾಯಿತು. ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯಗೊಳಿಸಲು ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಗೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಯಿತು.
ಮಾದರಿ ಗಾತ್ರವನ್ನು ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಯಾವುದೇ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಬಯೋಮಾರ್ಕರ್ ಆವಿಷ್ಕಾರವನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಟ್ಟುಕೊಂಡು ಹಿಂದಿನ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳನ್ನು ಗಾತ್ರ ನಿರ್ಣಯಕ್ಕೆ ಮಾನದಂಡಗಳಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಈ ವರದಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ನಮ್ಮ ಮಾದರಿಯು ಸಮರ್ಪಕವಾಗಿತ್ತು. ಅಧ್ಯಯನ ಸಮೂಹದಿಂದ ಯಾವುದೇ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಹೊರಗಿಡಲಾಗಿಲ್ಲ. ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ ಒಂದು ಆವಿಷ್ಕಾರ ಗುಂಪಿಗೆ (306 ಪ್ರಕರಣಗಳು, 74.6%) ಮತ್ತು ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗಾಗಿ ಆಂತರಿಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ ಗುಂಪಿಗೆ (104 ಪ್ರಕರಣಗಳು, 25.4%) ನಿಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ಗುರಿಯಿಲ್ಲದ ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗಾಗಿ ಆವಿಷ್ಕಾರ ಸೆಟ್‌ನಿಂದ ನಾವು ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿನಿಂದ ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ 70 ಪ್ರಕರಣಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. LC-MS ಡೇಟಾ ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ತನಿಖಾಧಿಕಾರಿಗಳು ಗುಂಪು ನಿಯೋಜನೆಗೆ ಕುರುಡರಾಗಿದ್ದರು. ಮೆಟಾಬಾಲೊಮಿಕ್ಸ್ ಡೇಟಾ ಮತ್ತು ಕೋಶ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಆಯಾ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು, ಚಿತ್ರ ದಂತಕಥೆಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳ ವಿಭಾಗಗಳಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಟ್ರಿಪ್ಟೊಫಾನ್, NADT ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಕೋಲಿಟಿಕ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವನ್ನು ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಮೂರು ಬಾರಿ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು.
ಅಧ್ಯಯನ ವಿನ್ಯಾಸದ ಕುರಿತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾಹಿತಿಗಾಗಿ, ಈ ಲೇಖನಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಪೋರ್ಟ್‌ಫೋಲಿಯೋ ವರದಿ ಸಾರಾಂಶವನ್ನು ನೋಡಿ.
ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳ ಕಚ್ಚಾ MS ಡೇಟಾ ಮತ್ತು ಉಲ್ಲೇಖ ಸೀರಮ್‌ನ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ MS ಡೇಟಾವನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 1 ಮತ್ತು ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಿಭಿನ್ನ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳಿಗಾಗಿ ಗರಿಷ್ಠ ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳನ್ನು ಪೂರಕ ಡೇಟಾ 3 ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. LUAD TCGA ಡೇಟಾಸೆಟ್ ಅನ್ನು https://portal.gdc.cancer.gov/ ನಿಂದ ಡೌನ್‌ಲೋಡ್ ಮಾಡಬಹುದು. ಗ್ರಾಫ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಇನ್‌ಪುಟ್ ಡೇಟಾವನ್ನು ಮೂಲ ಡೇಟಾದಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಲೇಖನಕ್ಕಾಗಿ ಮೂಲ ಡೇಟಾವನ್ನು ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ.
ರಾಷ್ಟ್ರೀಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶ ತಪಾಸಣೆ ಅಧ್ಯಯನ ಗುಂಪು, ಇತ್ಯಾದಿ. ಕಡಿಮೆ-ಡೋಸ್ ಕಂಪ್ಯೂಟೆಡ್ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿಯೊಂದಿಗೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಮರಣ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು. ಉತ್ತರ ಇಂಗ್ಲೆಂಡ್. ಜೆ. ಮೆಡ್. 365, 395–409 (2011).
ಕ್ರೇಮರ್, ಬಿಎಸ್, ಬರ್ಗ್, ಕೆಡಿ, ಅಬೆರ್ಲೆ, ಡಿಆರ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಫೆಟ್, ಪಿಸಿ ಕಡಿಮೆ-ಡೋಸ್ ಹೆಲಿಕಲ್ ಸಿಟಿ ಬಳಸಿ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ತಪಾಸಣೆ: ರಾಷ್ಟ್ರೀಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶ ತಪಾಸಣೆ ಅಧ್ಯಯನದಿಂದ (NLST) ಫಲಿತಾಂಶಗಳು. ಜೆ. ಮೆಡ್. ಸ್ಕ್ರೀನ್ 18, 109–111 (2011).
ಡಿ ಕೋನಿಂಗ್, ಎಚ್‌ಜೆ, ಮತ್ತು ಇತರರು. ಯಾದೃಚ್ಛಿಕ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಸಿಟಿ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಮರಣ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು. ಉತ್ತರ ಇಂಗ್ಲೆಂಡ್. ಜೆ. ಮೆಡ್. 382, ​​503–513 (2020).